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Caracterización morfológica y molecular de Pestalotiopsis spp. asociado a cáncer de tallo de arándano (Vaccinium corymbosum L.) en el Occidente de México

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dc.contributor.advisor Castruita Domínguez José Pedro
dc.contributor.author Limón Corona Mónica Lorena
dc.contributor.editor Centro universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias
dc.contributor.editor Universidad de Guadalajara
dc.contributor.other Maestría en Ciencias en Biosistemática y Manejo de Recursos de Naturales y Agrícolas
dc.date.accessioned 2020-07-23T06:07:13Z
dc.date.available 2020-07-23T06:07:13Z
dc.date.issued 2017
dc.identifier.uri http://repositorio.cucba.udg.mx:8080/xmlui/handle/123456789/6048
dc.description Tesis (Maestría en Ciencias en Biosistemática y Manejo de Recursos de Naturales y Agrícolas). Universidad de Guadalajara. CUCBA.
dc.description.abstract En México el cultivo de arándano (Vaccinium corymbosum L.) ha cobrado relevancia debido a la demanda mundial, actualmente se cultivan alrededor de 3207 hectáreas, de las cuales el 73% se concentra en el occidente del país. Una de las enfermedades recurrentes que afectan a esta planta, es el cáncer de tallo principalmente asociado a Pestalotiopsis spp. El objetivo del presente trabajo fue determinar la asociación de Pestalotiopsis spp. al cáncer de tallo, así como caracterizar morfológica y molecularmente aislados provenientes de Jalisco, Colima y Michoacán. Para lo cual se colectaron 204 plantas enfermas y se obtuvieron 68 aislados de Pestalotiopsis spp. Los aislados se caracterizaron por la presencia de micelio blanco, algodonoso y con abundantes acérvulos. Los conidios presentaron cinco células versicoloras, tres ornamentaciones apicales y una basal. La longitud de los conidios fue de 23.5 µm por 7.1 µm de ancho. El análisis de componentes principales de las variables morfológicas mostró la formación de tres grupos, uno de los cuales corresponde sólo a aislados de Jalisco, mientras que los dos restantes no tienen relación con el origen de aislamiento. Se llevaron a cabo pruebas de patogenicidad con 13 aislados de Pestalotiopsis spp. y uno de Fusarium sp., se inocularon tallos de plantas de arándano variedad Biloxi de un año de edad. Después de cinco días de la infección, se determinó la presencia de tejido necrótico y de acérvulos, lo que sugiere la asociación de este microorganismo con el cáncer de tallo. Posteriormente se realizó la extracción de ADN de 34 aislados fúngicos para su caracterización molecular mediante Inter Secuencias Simples Repetidas. Se utilizaron ocho pares de oligonucleótidos y se obtuvieron 135 fragmentos de 200 a 4000 pb, el nivel de polimorfismo fue de 81.5%. Finalmente, se construyó la matriz de presencia o ausencia de bandas, a la cual se analizó la similitud por medio del coeficiente de Jaccard y se realizó el dendrograma mediante el agrupamiento UPGMA, a partir del cual se determinó la presencia de cuatro grupos dentro de la población de estudio que no presentan relación con el origen de aislamiento.
dc.description.tableofcontents ÍNDICE DE FIGURAS ................................................................................................... iii ÍNDICE DE CUADROS ................................................................................................ vii ABREVIATURAS ........................................................................................................ viii 1. INTRODUCCIÓN ....................................................................................................... 1 2. ANTECEDENTES ...................................................................................................... 3 2.1. Arándano (Vaccinium corymbosum L.) ................................................................. 3 2.1.1. Situación actual del cultivo de arándano en México ....................................... 4 2.2. Enfermedades que afectan el arándano .................................................................. 5 2.2.1. Cáncer de tallo ................................................................................................. 6 2.2.1.1. Botryosphaeria corticis ............................................................................. 7 2.2.1.2. Neofusicoccum spp.................................................................................... 8 2.2.1.3. Phomopsis vaccinii ................................................................................... 9 2.2.1.4. Pestalotiopsis spp.................................................................................... 10 2.2.1.4.1. Taxonomía de Pestalotiopsis .......................................................... 12 2.3. Marcadores moleculares: ISSR ............................................................................ 14 3. JUSTIFICACIÓN ...................................................................................................... 16 4. HIPÓTESIS ............................................................................................................... 17 5. OBJETIVOS .............................................................................................................. 18 5.1. Objetivo general ................................................................................................... 18 5.2. Objetivos específicos ........................................................................................... 18 6. MATERIALES Y MÉTODOS .................................................................................. 19 6.1. Muestreo de plantas de arándano con cáncer de tallo .......................................... 19 6.2. Aislamiento de Pestalotiopsis spp. ...................................................................... 20 6.3. Caracterización morfológica de Pestalotiopsis spp. ............................................ 22 6.3.1. Caracterización morfológica macroscópica .................................................. 22 6.3.2. Caracterización morfológica microscópica ................................................... 23 6.4. Pruebas de patogenicidad ..................................................................................... 24 6.5. Caracterización molecular de Pestalotiopsis spp. ................................................ 25 6.5.1. Extracción de ADN genómico ...................................................................... 26 6.5.2. Electroforesis de ADN genómico.................................................................. 26 6.5.3. Inter Secuencias Simples Repetidas (ISSR) .................................................. 26 6.5.4. Análisis de datos moleculares ....................................................................... 28 7. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................................... 29 7.1. Muestreo de plantas de arándano con cáncer de tallo y aislamiento de Pestalotiopsis spp. ...................................................................................................... 29 7.2. Caracterización morfológica macroscópica de aislados de Pestalotiopsis spp.... 30 7.3. Caracterización morfológica microscópica de aislados de Pestalotiopsis spp. ... 32 7.4. Análisis de componentes principales ................................................................... 35 7.5. Pruebas de patogenicidad ..................................................................................... 41 7.6. Caracterización molecular .................................................................................... 46 8. CONCLUSIONES ..................................................................................................... 53 9. LITERATURA CITADA .......................................................................................... 54
dc.format application/PDF
dc.language.iso es
dc.publisher CUCBA
dc.publisher Universidad de Guadalajara
dc.subject cáncer de tallo, Pestalotiopsis, micelio.
dc.title Caracterización morfológica y molecular de Pestalotiopsis spp. asociado a cáncer de tallo de arándano (Vaccinium corymbosum L.) en el Occidente de México
dc.type Maestría
dc.type Tesis
dc.rights.holder Universidad de Guadalajara
dc.rights.holder Limón Corona Mónica Lorena


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