Actividad genotóxica, antigenotóxica y antimutagénica de Psittacanthus calyculatus (DC.) G. don (muérdago) en linfocitos humanos y de ratas

Abstract

El Psittacanthus calyculatus o “muérdago verdadero” es una planta parasita utilizada en forma de te para el tratamiento de diversas enfermedades. En el presente estudio se evaluó en linfocitos de humanos y de ratas la actividad genotóxica, antigenotóxica y antimutagénica de extractos acuosos liofilizados obtenidos a partir de hojas de Psittacanthus calyculatus. El material vegetal se colectó de las plantas parásitas presentes en árboles de Pithecellobium dulce (húamuchil) en la zona metropolitana de Guadalajara. Para la evaluación de la genotoxicidad, se utilizó la prueba del cometa alcalino en linfocitos humanos y de ratas. Las células sanguineas se colocaron en capas de agarosa fijadas en portaobjetos y se sumergieron en soluciones al 0, 5, 50 y 100 ppm del liofilizado por 5, 10 y 15 horas para cada concentración. Para los controles negativos (agua destilada) y positivo (EMS 5 mM), los linfocitios se sumergieron en las respectivas soluciones por 2 horas. En la actividad antigenotóxica los linfocitos humanos y de ratas fueron expuestos de forma simultánea una solución de EMS 5 mM a las mismas concentraciones de los extractos acuosos de P.calyculatus pero solo durante 2 horas. La actividad antimutagénica se evaluó a las mismas concentraciones de los extractos exponiendo los linfocitos por 2 horas a la solución de EMS 5 mM, seguido de un lavado con agua destilada e inmersión en los extractos durante 1, 2 y 3 horas. Finalizado el tiempo de exposicion los portaobjetos con los linfocitos de humanos y ratas se sometieron al proceso de lisis durante 48 horas a 4 °C y enseguida fueron lavados con agua destilada, se colocaron en una cámara de electroforesis horizontal con solución amortiguadora (NaOH 30 mM, Na2EDTA 1mM, pH 13) por un tiempo de 45 min a 4 ºC para después realizar el corrimiento electroforético a 200 mA, 9 V durante 30 min. Finalizada la electroforesis los portaobjetos se lavaron y se adicionó 100 µL de una solución de bromuro de etidio (20 µg/ 1 mL). Inmediatamente se realizo la medición de la longitud de la cauda del cometa con la ayuda de un microscopio de fluorescencia (Zeiss, modelo Axioskop 40 con un filtro de excitación 515-560 nm). No se observó actividad genotóxica significativa en linfolcitos de ratas excepto a la concentración de 100 ppm a 10 h. Se observó actividad antigenotóxica en linfocitos humanos y de rata en el agente genotoxico mezclado con los extractos a concentraciones de 5, 50 y 100 ppm que fueron significativamente menores (p<0.05) comparadas con células tratadas con solo EMS 5mM. En la actividad antimutagéneica se observó menor daño estadísticamente significativa comparado con el control positivo. Según lo observado, bajas concentraciones de los extractos de P. calycutatus no poseen actividad genotóxica, sin embargo, altas concentraciones si pueden afectar la integridad del material genético. El efecto antigenotóxico observado, caracterizado por la disminución de la longitud de la cauda, se debió a un efecto protector no solo contra el mutágeno positivo estudiado sino, inclusive, contra el daño genético basal. Similarmente, la actividad antimutagénica observada muestra un efecto en la reparación del ADN. En conclusión resulta saludable y deseable la ingesta de extractos de Psittacanthus calyculatus siempre y cuando no se tomen altas cantidades.