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Análisis de expresión de lipasas de Carica papaya en respuesta a Corynespora cassiicola, ácido jasmónico y BTH

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dc.contributor.advisor Sánchez Hernández Carla Vanessa
dc.contributor.author Cruz Franco Samuel Enrique
dc.contributor.editor Centro universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias
dc.contributor.editor Universidad de Guadalajara
dc.contributor.other Maestría en Ciencias en Biosistemática y Manejo de Recursos de Naturales y Agrícolas
dc.date.accessioned 2020-07-23T06:01:30Z
dc.date.available 2020-07-23T06:01:30Z
dc.date.issued 2016
dc.identifier.uri http://repositorio.cucba.udg.mx:8080/xmlui/handle/123456789/6032
dc.description Tesis (Maestría en Ciencias en Biosistemática y Manejo de Recursos de Naturales y Agrícolas). Universidad de Guadalajara. CUCBA.
dc.description.abstract Las lipasas son enzimas que hidrolizan los enlaces éster de los triglicéridos. En plantas, se encuentran implicadas en desarrollo, germinación de semillas, morfogénesis y en respuesta a estrés biótico. El papel en respuestas de defensa que desempeñan en plantas, se relaciona con la biosíntesis de oxilipinas (señalización), muerte celular y actividad antimicrobiana. En el presente trabajo se analizó la expresión génica de 5 lipasas putativas, pertenecientes a las familias GDSL (Gly-Asp-Ser-Leu), (CpLip2, CpLip3, CpEst) y clase III (CpLip4, CpLip5), en tejido foliar de plantas de papaya infectadas con el hongo necrotrófico Corynespora cassiicola; o tratadas con ácido jasmónico (AJ) y BTH (ácido 1,2,3-benzotiadiazol-7-carbotioico, S-metil éster). En respuesta a la infección con Corynespora cassiicola se observó, desde las 24 horas posteriores a la inoculación (hpi), un incremento en los niveles de transcritos para CpLip2, CpLip5 y CpEst. Sin embargo, CpEst presentó la mayor acumulación de transcritos con un aumento de 900 veces, después de 72 hpi. Estos mismos genes aumentaron sus niveles de expresión en las plantas tratadas con AJ, pero su acumulación fue más rápida, observándose desde las 6 horas posteriores al tratamiento (hpt). El tratamiento con BTH no modificó la expresión de ninguna de las lipasas analizadas. Los resultados obtenidos indican que los genes CpLip2, CpLip5 y CpEst se inducen como parte de la respuesta defensiva en papaya contra Corynespora cassiicola, posiblemente su regulación ocurre a través de la ruta de señalización del AJ. La homología estructural que guardan estas lipasas con otras proteínas implicadas en defensa y su perfil de expresión, soporta la teoría de que CpLip2, CpLip5 y CpEst podrían ser proteínas de defensa relacionadas con la respuesta a patogénesis.
dc.description.tableofcontents Índice de figuras 6 Índice de cuadros 6 Abreviaturas 7 Resumen 11 Abstract 12 Introducción 13 1 Antecedentes 14 1.1 Defensa inducible en patogénesis 14 1.2 Ácido salicílico y SAR 16 1.3 Ácido jasmónico y defensa 21 2 Lipasas 23 2.1 Clasificación y estructura 23 2.2 Lipasas de origen vegetal 26 2.3 Aplicaciones biotecnológicas de las lipasas vegetales 29 2.4 Lipasas en defensa 30 2.5 Lipasas en Carica papaya 33 3 Hipótesis 35 4 Objetivos 35 4.1 Objetivo general 35 4.2 Objetivos específicos 35 5 Materiales y métodos 36 5.1 Crecimiento de plantas 36 5.2 Ensayo de inducción con ácido jasmónico 36 5.3 Ensayo de inducción con Actigard® (BTH) 36 5.4 Aislamiento de Corynespora cassiicola 37 5.5 Ensayo de infección con Corynespora cassiicola 37 5.6 Extracción de RNA y síntesis de cDNA 38 5.7 Ensayos de expresión génica 38 5.7.1 Diseño de oligonucleótidos y PCR punto final 38 5.7.2 PCR cuantitativo (qPCR) 39 Página 10 5.8 Comparación de secuencias con el uso de herramientas bioinformáticas 40 6 Resultados y discusiones 42 6.1 Análisis de secuencias 42 6.2 Extracción de RNA y PCR preliminares 48 6.3 Ensayos de expresión 48 6.3.1 Infección con Corynespora cassiicola 50 6.3.2 Inducción con ácido jasmónico 52 6.3.3 Inducción con BTH 54 7 Conclusiones 56 8 Bibliografía 57 9 Anexos 64
dc.format application/PDF
dc.language.iso es
dc.publisher CUCBA
dc.publisher Universidad de Guadalajara
dc.subject lipasas, triglicéridos, enlaces éster.
dc.title Análisis de expresión de lipasas de Carica papaya en respuesta a Corynespora cassiicola, ácido jasmónico y BTH
dc.type Maestría
dc.type Tesis
dc.rights.holder Universidad de Guadalajara
dc.rights.holder Cruz Franco Samuel Enrique


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